周小培先生1920年生于揚州一個普通的家庭，15歲從藝，師從葉東成，周殿魁，由于他勤奮好學，加之天資聰明，很快就成了年青的挑大梁的演員，在四十年代及解放初期，就在上海、南京、揚州、鎮(zhèn)江等地，有了很大的影響，并深受廣大揚劇觀眾的喜愛。

1953年加盟蘇北實驗揚劇團（1954年改為江蘇省揚劇團）。

1958年應文化部邀請，周小培隨江蘇省揚劇團到北京懷仁堂，為黨和國家領導人演出《挑女婿》、《斷橋》等劇目，受到了周總理等黨和國家領導人的親切接見，并合影留念。1957年在《恩仇記》中周小培扮演的鄧炳如一角，在華東五省一市的匯演中榮獲二等獎。

周小培是揚劇界第一批著名演員，曾被媒體和觀眾譽為揚劇泰斗。

2004年5月22號邗江區(qū)文體局在揚州大劇院舉辦了“周小培從藝七十周年戲曲名家名段大型演唱會”，周小培先生以85歲的高齡參加了演出，整個演出十分精彩，盛況空前。晚會為周小培先生輝煌的藝術人生畫上了一個圓滿的句號。

于2006年4月29日，因病久治無效辭世，享年86歲。

周小培從藝七十年來，在藝術的長河中不斷耕耘，勇于創(chuàng)新，特別是在揚劇小生的聲腔方面有了較大的發(fā)展和創(chuàng)造，獨樹一幟，自成一派，并被同行和觀眾認可和喜愛，也被稱為“周派”。他主攻小生，其嗓音高亢圓潤，字正腔圓，舒展流暢，悅耳動聽，聲情并茂，感人至深。在幾十年的從藝生涯中成功地塑造了梁山伯、鄧炳如、許仙、申貴生等鮮活的正反面小生人物形象，他演唱的《單下山》受到揚劇觀眾較高的贊譽，多年來一直被同行與戲迷票友傳唱，經(jīng)久不衰。