1931年“九·一八”事變后，閻生堂參加遼寧民眾自衛(wèi)軍第三十五路軍，任連長。二團團長馬永范跟閻生堂結(jié)成拜把兄弟，煽動地利用戰(zhàn)斗機會倒戈向日偽投降，他拒不答應(yīng)，將馬永范擊斃。此后，閻生堂帶領(lǐng)連隊主動出擊數(shù)十次，打死日偽軍500余名。1933年8月，自衛(wèi)軍搶運軍火，被3000多名日偽軍包圍在鳳城南部山區(qū)塔溝，與第三十五路軍聯(lián)合作戰(zhàn)的第六路軍司令李春潤負(fù)重傷，由第三十五路軍司令李子榮護(hù)送離開東北，閻生堂帶領(lǐng)部隊突圍。1934年農(nóng)歷正月十二日，閻生堂帶70多名戰(zhàn)士在安東與鳳城交界處油盤溝宿營，被日偽軍100多人包圍。閻生堂舉槍將日本守備隊司令日森擊斃，日偽軍失去指揮退走。1935年春，偽安東警察署日本指導(dǎo)官清水帶人到鳳城縣富家堡子，把為自衛(wèi)軍修過槍的唐鐵匠和為自衛(wèi)軍藏過槍的馬榮奎、劉貴勝等抓住拷問，追查閻生堂的槍支藏在何處。閻生堂得到情報，連夜趕到富家堡子，將清水及10名日偽軍擊斃。1935年農(nóng)歷七月七日，守備隊100多名偽軍由一個姓紀(jì)的連長帶領(lǐng)，到韓家村小石家堡子抓捕閻生堂，閻生堂帶領(lǐng)戰(zhàn)士化裝成農(nóng)民，直闖其住處，高聲喝叫“我就是閻生堂，誰敢上來抓呀？！”偽軍繳械投降。閻生堂到另一住處，將偽連長抓獲。其間，1934年東北民眾自衛(wèi)軍第二十八路軍參謀長苗可秀創(chuàng)建了中國少年鐵血軍，閻生堂任第一路軍指揮兼行政區(qū)長官。第一路軍編制4個大隊，500多人，官兵是閻生堂選拔的，軍事素質(zhì)較高，是鐵血軍的主力。主要活動在安東、鳳城、岫巖交接的三角地帶，牽制和打擊日偽軍。1935年，鐵血軍第一路軍受到日偽軍包圍，傷亡很大。 8月 22日，日本守備隊在安東縣楊家村抓捕閻生堂的岳父等六名親屬，押到鳳城縣白旗鄉(xiāng)殺害。1936年11月，閻生堂率部隊匯合少年鐵血軍第二、三、四路軍趙同、趙慶吉、白君實等部隊連續(xù)攻打龍王廟、沙里寨、白旗等日偽據(jù)點。日本守備隊不斷派出便衣特務(wù)偵察少年鐵血軍情況，其中兩名特務(wù)在安東縣合隆鄉(xiāng)南崗頭村被鐵血軍抓獲投入冰窟窿溺死。1936年農(nóng)歷冬月初二（12月16日），日偽軍包圍合隆鄉(xiāng)南崗頭村，以“通匪”罪名，將全村200余人槍殺，房子全部燒光，制造了駭人聽聞的“南崗頭慘案”。

1936年12月18日清晨，閻生堂帶領(lǐng)十幾名戰(zhàn)士隱蔽在鳳城縣沙里寨鄉(xiāng)廟臺溝，駐地被日偽軍包圍。在掩護(hù)戰(zhàn)士突圍時，他的腿被子彈打斷，坐在地上，向日偽軍射擊，最后開槍自殺殉國，終年26歲。