李妮因受到家庭的熏陶，從小便開始學(xué)習(xí)小提琴、二胡等樂器。1981年，17歲的李妮跟隨父親李文化觀看了多部改革開放后引進(jìn)的國(guó)外電影，她也第一次感受到電影的魅力。此后，父親請(qǐng)來了都郁做她的啟蒙老師。在都郁老師的指引下，李妮于1982年考入了中央戲劇學(xué)院導(dǎo)演系。1986年，擔(dān)任戲曲電影《芙蓉女》的助理導(dǎo)演。

1990年，與李文化共同執(zhí)導(dǎo)由黃國(guó)強(qiáng)、楊鳳一合作主演的武俠電影《索命逍遙樓》。1991年，與李文化聯(lián)合執(zhí)導(dǎo)由劉紅梅、王文升等合作主演的古裝電影《落花坡情仇》。1992年，執(zhí)導(dǎo)喜劇電影《初吻》，這是李妮獨(dú)立執(zhí)導(dǎo)的首部電影；同年，與李文化共同執(zhí)導(dǎo)槍戰(zhàn)動(dòng)作電影《黑雪》。

1993年，由其自編自導(dǎo)的反毒題材電影《黑火》上映。1995年，執(zhí)導(dǎo)由陸劍民、祁艷、謝昀杉聯(lián)合主演的戰(zhàn)爭(zhēng)劇《太行山突圍》。2000年，執(zhí)導(dǎo)由孫淳、何冰等共同主演的愛情劇《真情到永遠(yuǎn)》；同年，執(zhí)導(dǎo)以優(yōu)秀共產(chǎn)黨員事跡改編的紀(jì)實(shí)劇《以時(shí)代的名義》中的單本劇《正義是美麗的》，該劇獲得金劍獎(jiǎng)最佳短片電視劇獎(jiǎng)、金鼎獎(jiǎng)最佳短片電視劇獎(jiǎng)。

2005年，與魯冬青聯(lián)合執(zhí)導(dǎo)青春劇《青春沖動(dòng)》。2008年10月，由李妮執(zhí)導(dǎo)，李佳、孫松合作主演的情感劇《相逢在雨后》在央視一套播出。2009年，執(zhí)導(dǎo)由果靜林、林熙越共同主演以書法為主題的劇情電影《墨香天使》。2010年，執(zhí)導(dǎo)由馮紹峰、孫松等共同主演的都市言情劇《小城大愛》。

2012年，由其執(zhí)導(dǎo)的當(dāng)代都市劇《老爹的非“城”勿擾》播出，該劇獲得第5屆新農(nóng)村電視藝術(shù)節(jié)農(nóng)村題材電視劇三等獎(jiǎng)。2014年，執(zhí)導(dǎo)由陳志朋、羅立群等聯(lián)合主演的愛情電影《第一眼愛情》，該片入圍澳門國(guó)際電影節(jié)最佳故事片獎(jiǎng)；同年，執(zhí)導(dǎo)由李幼斌、李菁菁等聯(lián)袂主演的當(dāng)代都市劇《愛的保鏢》。

2017年7月，由李妮執(zhí)導(dǎo)，袁詠儀、丁海峰、胡杏兒等聯(lián)合主演的都市情感劇《領(lǐng)養(yǎng)》播出，該劇獲得第12屆中美電影節(jié)優(yōu)秀中國(guó)電視劇金天使獎(jiǎng)。2018年3月，由其執(zhí)導(dǎo)的都市劇《新萬家燈火》首播，該劇由李泰、劉雅瑟合作主演；同年，執(zhí)導(dǎo)由劉奕君、倪大紅合作主演的犯罪劇《無處躲藏》。

李妮的父親是電影導(dǎo)演李文化。在中央戲劇學(xué)院讀書期間，李妮與戲劇導(dǎo)演李六乙相識(shí)，之后二人結(jié)婚。

李妮擅長(zhǎng)運(yùn)用鏡頭刻畫人物內(nèi)心的情感，其對(duì)女性題材的思索琢磨能為電視劇增色加分。而且，她有著不怕累的精神和謙虛的學(xué)習(xí)態(tài)度，執(zhí)導(dǎo)的作品類型也非常廣泛，有槍戰(zhàn)片、動(dòng)作片、言情片等，她在不斷的藝術(shù)實(shí)踐中摸索自己的風(fēng)格，形成了自己獨(dú)具一格的影片風(fēng)格，用實(shí)際行動(dòng)打破了一些業(yè)內(nèi)人士對(duì)女性導(dǎo)演的質(zhì)疑。她跟男導(dǎo)演是不一樣的，她以深邃、自然、流暢、細(xì)膩的表達(dá)方式見長(zhǎng)，并能以女性導(dǎo)演特有的觀察力和鑒賞力賦予影片更為生動(dòng)的靈魂（騰訊網(wǎng)、齊魯晚報(bào)綜合評(píng)）。