繼任家督
大永5年（1525年），上杉朝定出生。父親為上杉朝興，母親不明。
足利氏一直在與 上杉氏爭奪著 關(guān)東地區(qū)霸權(quán)，關(guān)東地區(qū)亂象不斷。 北條氏綱趁亂向武藏野大平原進(jìn)攻，大永4年（1524年），據(jù)守 江戶城的上杉朝興首先受到了攻擊。朝興被北條氏綱打敗舍棄了江戶城逃往 河越城中，天文6年（1537年）4月，曾十四度與 后北條氏交戰(zhàn)的扇谷上杉修理大夫朝興在河越城去世，朝定繼任扇谷上杉家家督。
河越城失守
但是朝興的死、年輕的朝定繼任家督讓北條氏綱看到了良機(jī)，他加強(qiáng)了對(duì)河越城的圍攻。作為朝興的兒子，十二歲的家督上杉朝定年少氣盛，會(huì)同自己的叔父朝成，為遵從父親的遺言曾兩次率軍攻打北條氏希望奪回江戶城，同年七月再與北條氏綱所率大軍會(huì)戰(zhàn)于三木原。結(jié)果上杉軍戰(zhàn)敗，朝成被俘虜。隨后在朝定拼死的抵擋之下，雙方在河越城再次交鋒，朝定不敵而放棄河越城逃往 松山城并在此后以其為居城。北條氏綱攻占了河越城后，領(lǐng)兵退回 小田原城。
北條包圍網(wǎng)
天文10年（1541年），北條氏綱去世。朝定與長年斗爭的宿敵山內(nèi)上杉家的 上杉憲政聯(lián)合，共同對(duì)付北條氏綱的繼承人 北條氏康。天文14年（1545年）兩上杉又和 駿河國的 今川氏和 古河公方 足利晴氏合作，形成了一個(gè)共同對(duì)抗北條氏的同盟，將北條氏整個(gè)地包圍起來。 甲斐國的 武田信玄也應(yīng)邀前來援助 今川義元。但經(jīng)過激烈的談判，北條氏康將富士川以東的駿河領(lǐng)歸還今川氏換得今川義元的退兵，信玄也因 信濃國局勢(shì)有變而主動(dòng)和解，北條氏避免了多面受敵的風(fēng)險(xiǎn)。
然而次年（天文15年（1546年）），兩上杉仍然組織了號(hào)稱八萬之眾的大軍攻打河越城，盡管遭遇善戰(zhàn)的河越城主 北條綱成，但城落似乎近在咫尺。
河越夜戰(zhàn)
此時(shí)足利晴氏圍困河越城的東邊， 太田資正率軍攻打河越城的北邊，而城西和城南就由扇谷、山內(nèi)兩上杉氏的主力配合著籠城，氏康便假意議和，達(dá)到了使聯(lián)軍麻痹的效果。
天文15年4月20日（1546年5月19日）夜，北條軍點(diǎn)燃一支火把為暗號(hào)，由城內(nèi)的北條綱成和城外的北條氏康聯(lián)合對(duì)八萬聯(lián)軍進(jìn)行了夾擊，日本戰(zhàn)國中的三大奇襲戰(zhàn)之一—— 河越夜戰(zhàn)就此打響，聯(lián)軍在意想不到的情況下慘敗。扇谷上杉氏麾下有名的勇將難波田彈正憲重奮戰(zhàn)然最終箭矢用盡、刀槍折斷，只得跳入東明寺口的古井中自殺身亡。難波田憲重的兒子隼人佐以及所率領(lǐng)的三千余上杉軍也全部戰(zhàn)死。
一心想要實(shí)現(xiàn)父親遺愿的朝定，以及家老太田資賴也戰(zhàn)死于亂軍之中。朝定死時(shí)年僅21歲。其他的聯(lián)合軍四散。而山內(nèi)上杉氏的上杉憲政則先是逃往古河公方的足利晴氏避亂，又因北條綱成很快攻占了古河，再次逃亡到了平井城。
但是有關(guān)朝定死亡狀況的記錄傳達(dá)完全不存在，所以也包含朝定實(shí)際上是突然病死的的可能性。因此也有聯(lián)軍崩潰不是由于北條軍的奇襲，而是由于朝定的猝死的說法。
身后事
朝定死后，扇谷上杉家斷絕了。1561年（永祿四年）， 上杉謙信攻破 松山城。扇谷家庶流——上杉朝寧之子上杉憲勝在謙信的支持下復(fù)興了扇谷上杉家，但不久老冤家北條綱成又攻破此城，憲勝投降。
家系
宗家
重顯 - 朝定 - 顯定 - 氏定 - 持定 - 持朝 - 顯房 - 持朝（再襲） - 政真 - 定正 - 朝良 - 朝興 - 朝定 - 憲勝
分家?支流
八條上杉家
朝顯 - 滿朝 - 滿定 - 持定 - 成定
加賀爪上杉家
政定 - 忠定 - 政泰 - 泰定 - 政豐 - 政尚 - 忠澄 - 直澄 - 直清 | 斷絕