考入湖南省立第三女子師范，開始接受新思想的熏陶，逐步樹立起為人民的解放事業(yè)而奮斗的理想。1926年光榮加入中國共產(chǎn)黨，走上了革命的征途。在三師，王祖娥積極聯(lián)絡(luò)同學(xué)，從事革命活動(dòng)。她動(dòng)員一部分人進(jìn)入北伐軍某部主辦的政訓(xùn)班，接受革命教育，啟發(fā)有志青年投奔革命道路，撒播革命種子。

零陵“宥日事變”以后，永州城內(nèi)反共猖獗，殺氣騰騰，黨組織遭到嚴(yán)重破壞。王祖娥毅然接受黨組織委派，秘密回到零陵，重建黨的組織。她以女校教員身份為掩護(hù)，暗地聯(lián)絡(luò)黨員，秘密發(fā)動(dòng)群眾，慎重穩(wěn)妥地開展工作。不久就發(fā)展了曾鳴鑾、何若冰等十余青年入黨，使零陵的黨組織在敵人眼皮底下再次活躍起來。

正當(dāng)黨組織蓬勃發(fā)展時(shí)，黨組織被叛徒出賣。

反動(dòng)派緊急出動(dòng)，將女校團(tuán)團(tuán)圍住，企圖將我地下黨組織一網(wǎng)打盡，王祖娥落入敵手。

嚴(yán)刑拷打隨即而至，一次次折磨使她遍體鱗傷，但是，王祖娥以一個(gè)共產(chǎn)黨員的鋼鐵意志挺住一次次的酷刑，拒不暴露黨的組織和活動(dòng)。敵人見硬的不行，就來軟的，派爪牙向她哥嫂活動(dòng)，說只要王祖娥同意嫁給駐軍師長張其雄做姨太太，立即釋放，任享榮華富貴。王祖娥聽后，斬釘截鐵地痛斥：“革命不怕死，怕死不革命。軍閥狗官，白日做夢(mèng)，可恥已極……”把張其雄罵了個(gè)狗血噴頭。

四個(gè)多月的誘逼拷打，敵人一無所獲。最后，張其雄惱羞成怒，于1929年正月二十五日將王祖娥捆綁示眾。王祖娥大義凜然，一路高呼：“打倒國民黨反動(dòng)派”、“中國共產(chǎn)黨萬歲！”沿街群眾無不聲淚俱下。當(dāng)日，她被殺害于北門徐家井皂角樹下，年僅23歲。