周浩東出生于重慶市，他從小就跟著父親學(xué)畫畫。1984年，由于喜歡唱流行歌，他大學(xué)考入了四川音樂學(xué)院聲樂系歌劇專業(yè)。大三時(shí)，他在街上被北京電影學(xué)院的兩個(gè)教授看中，并被對方允諾可以破格錄取北京電影學(xué)院，但由于父母不同意，他便放棄了這個(gè)機(jī)會(huì)。1991年，周浩東考入了北京電影學(xué)院表演系；此外，他不僅從事過MTV編導(dǎo)工作，而且還擔(dān)任過《西部汽車報(bào)》特約記者、電視劇《東方風(fēng)云》文學(xué)統(tǒng)籌。

1994年，與詹小楠合作主演年代劇《秦淮世家》，在劇中飾演唐小春的好朋友陸影，這是他的首部電視劇作品，從而正式進(jìn)入演藝圈。

1997年，出演鄭少秋、梁琤、黃文豪主演的古裝武俠劇《江湖奇?zhèn)b傳》，在劇中飾演十三阿哥愛新覺羅·胤祥，這是他首次在影視作品中嘗試古裝扮相。

1998年，與劉錫明、彭丹合作主演劇情電影《飛越危情》，在劇中飾演與男主角方偉聯(lián)手將洪飛擊斃的內(nèi)地警察趙新；同年，與侯繼林合作主演古裝劇《高陽公主》，在劇中飾演高陽公主的駙馬房遺愛。

2000年，出演趙文卓、蔣勤勤、劉錫明主演的民國情感劇《青河絕戀》，在劇中飾演沙河鎮(zhèn)富商楊景福。

2002年，出演吳奇隆、陽光、于波主演的科幻劇《少年王》，在劇中飾演男主角衛(wèi)斯理的二叔衛(wèi)百里。

2003年2月1日，其出演的古裝武俠劇《射雕英雄傳》在CCTV-1播出，而他在劇中則飾演了武功高強(qiáng)、行俠仗義的全真派弟子丘處機(jī)。

2004年，出演姜武、楊立新、杜源主演的警匪懸疑劇《追蹤》，在劇中飾演警校畢業(yè)生林天歌；同年，出演黃曉明、劉亦菲、王洛勇主演的古裝武俠劇《神雕俠侶》，在劇中飾演陸展元的弟弟、陸無雙的父親陸立鼎。

2005年，與高田昊、鄭佳欣、李英杰合作主演劇情電影《西域情仇》，在片中飾演史東山的兒子史義成。

2006年，與湯鎮(zhèn)宗、金巧巧、劉琦合作主演都市情感劇《愛我就給我一個(gè)家》，在劇中飾演海天集團(tuán)董事長洪劍；同年，出演王洛勇、于榮光、努爾比亞主演的諜戰(zhàn)劇《冰山上的來客》。

2007年，與張澍合作主演革命戰(zhàn)爭電影《鐵血北疆曲》，在片中飾演程邁的丈夫麥新；同年，出演孫紅雷主演的都市懸疑劇《落地，請開手機(jī)》。

2008年，主演楊過華執(zhí)導(dǎo)的劇情電影《生命斑馬線》，在片中飾演身為交通警察的男主角浩東；同年，與陳昊、王鷗、李欣合作主演刑偵懸疑劇《刻不容緩》，在劇中飾演干練智慧的刑警隊(duì)長羅軍。

2009年，與金巧巧、姜超、湯加麗合作主演劇情電影《天下太忙》，在片中飾演事業(yè)有成、游走在妻子與情人之間的男主角秦業(yè)；同年，出演李路執(zhí)導(dǎo)的家庭情感劇《老大的幸�！�，在劇中飾演事業(yè)有成且霸道、虛榮的房地產(chǎn)公司老總傅吉安。

2010年，與李增瑞一同參加“喜來塢明星跨界才藝大賽”；同年5月，與金巧巧一同參加天津電視臺(tái)脫口秀節(jié)目《夫妻天下》的錄制；之后，出演胡歌、唐嫣、董璇主演的都市商戰(zhàn)劇《無懈可擊之高手如林》，在劇中飾演馮璐菲的父親、連鎖超市MJM集團(tuán)董事長馮修文，與董璇飾演一對父女。

2011年，與王姬、杜淳、蘇可合作主演年代劇《大漢口》，在劇中飾演男主角陸修武的父親陸浩昆，與杜淳飾演一對父子；同年，出演孫遜、曾黎、宋柳主演的革命戰(zhàn)爭劇《最后征戰(zhàn)》，在劇中飾演解放軍第136團(tuán)保衛(wèi)干事王坤山；此外，他還與石文中、鄭曉寧合作主演警匪懸疑劇《暗線》，在劇中飾演熱心、善良的男主角陳鐵奇。

2012年，與張婷婷、王光輝合作主演愛情電影《溱潼之戀》，在片中飾演心地善良且用情專一的男主角大偉。同年，與于越、果靜林合作出演電視劇《一半花落一半花開》。

2013年，與黃覺、張衣、潘時(shí)七合作主演抗戰(zhàn)劇《大水井風(fēng)云》，在劇中飾演木魚寨寨主田斯文。

2014年，出演趙洋執(zhí)導(dǎo)的微電影《愚人碼頭》，在片中飾演專職做自殺服務(wù)盈利的精明商人、“自殺俱樂部”老板周厚全。

2015年1月10日，獲得“陽光獎(jiǎng)暨九恒·金薔薇獎(jiǎng)?lì)C獎(jiǎng)盛典”德藝雙馨獎(jiǎng)；同年6月5日，其與劉青、吳妍妍、趙千紫主演的驚悚懸疑電影《異種》上映，而他在片中則飾演了男主角岸生。

2016年2月19日，其主演的驚悚懸疑電影《致命怪談》上映；同年，擔(dān)任電影《少年英雄傳》的總制片人；之后，與葉相明合作主演劇情電影《父親與我》。

2017年3月28日，其主演的當(dāng)代檢察反腐劇《人民的名義》在湖南衛(wèi)視播出，而他在劇中則飾演了漢東省檢察院副檢察長林建國。

2019年6月，出演國內(nèi)首部關(guān)于汶川地震救災(zāi)題材的3D院線電影《極震區(qū)》。

周浩東的父母都是重慶師范大學(xué)的老師，但由于遠(yuǎn)在山東的姑媽、姑父膝下無子，父母便將他過繼給了他們。周浩東大學(xué)畢業(yè)便與女友結(jié)婚了，但婚姻沒有維持多久便結(jié)束了。

2016年6月4日，周浩東參加在臨汾錦悅城舉行的“助力臨汾贏取山西省旅游發(fā)展大會(huì)主辦權(quán)”公益活動(dòng)。

周浩東具有精湛的演技，他所扮演的每一個(gè)角色都深入人心。周浩東自出道以來就被定位成穩(wěn)重大方、成熟正派的演員，他在電視劇《最后征戰(zhàn)》中，一改儒雅霸氣的大老板形象，以自己對角色的理解，將偽黨員這一人物形象得刻畫地惟妙惟肖。周浩東在電視劇《落地請開手機(jī)》中有著不俗的表現(xiàn)，他的身上具有極強(qiáng)的喜劇細(xì)胞，在拍攝現(xiàn)場經(jīng)常為大家制造出輕松愉快的氛圍（新浪評）。

周浩東給人的印象是很隨和的，雖言語不多，卻無半點(diǎn)明星架子。周浩東不僅面部英俊，體格也非常男人，身上肌肉鼓鼓的。周浩東對劇本的研究頗深，他的表演水平高超，他拍戲時(shí)過得很快（山西新聞網(wǎng)評）。

周浩東在電視劇《大水井風(fēng)云》中，把一個(gè)山寨老大應(yīng)有的“素質(zhì)”表現(xiàn)得淋漓盡致（搜狐評）。