簡(jiǎn)歷
1916年9月17日 出生于四川省德陽(yáng)縣。
1936-1939年 在成都華西協(xié)和大學(xué)醫(yī)科學(xué)習(xí)。
1939-1942年 在成都華西協(xié)和大學(xué)理學(xué)院制藥系學(xué)習(xí)。
1942年 四川省合川縣衛(wèi)生材料廠(chǎng),做化驗(yàn)工作。
1942-1944年 貴陽(yáng)市高級(jí)醫(yī)士職業(yè)學(xué)校任教。
1944-1946年 華西協(xié)和大學(xué)藥學(xué)系任助教。
1946-1950年 華西協(xié)和大學(xué)藥學(xué)系任講師。
1950-1963年 四川醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系講師
1963-1979年 四川醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系任副教授。
1979年 四川醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系任教授。
生平簡(jiǎn)介
王憲楷,1916年9月生,四川省德陽(yáng)縣人。1936年考入華西協(xié)和大學(xué)醫(yī)科,3年后轉(zhuǎn)入該校理學(xué)院制藥系。1942年畢業(yè),獲理學(xué)士學(xué)位。并獲得美國(guó)紐約州立大學(xué)理學(xué)士學(xué)位。同年到四川省合川縣衛(wèi)生材料廠(chǎng)做化驗(yàn)工作,不久至貴陽(yáng)市高級(jí)醫(yī)士職業(yè)學(xué)校任教。1944年回成都華西協(xié)和大學(xué)擔(dān)任助教,1946年升任講師,1963年升任副教授,1979年升任教授,并擔(dān)任中草藥化學(xué)(天然藥物化學(xué))教研室主任。任博士生導(dǎo)師,1992年獲國(guó)務(wù)院頒發(fā)的政府特殊津貼。曾兼任中國(guó)藥學(xué)會(huì)四川省分會(huì)理事及分會(huì)中藥及天然藥物分科學(xué)會(huì)主任委員、中國(guó)藥學(xué)會(huì)成都分會(huì)理事、《藥學(xué)學(xué)報(bào)》、《華西藥學(xué)雜志》、《天然產(chǎn)物》編委等職。
1953年著《化學(xué)成分生藥學(xué)》;1952年著《生物堿》;1965年著《植物成分分析鑒定(Ⅰ)生物堿》;《植物成分分析學(xué)鑒定(Ⅱ)甙類(lèi)、揮發(fā)油》,人民衛(wèi)生出版社約稿,后因文化大革命而未能出版。1963年著《藥用植物成分研究》,1975年著《中草藥有效成分研究中的一些參考情況》。
著作共約400萬(wàn)字,論文80余篇,主要研究生物堿化學(xué)。于40多種中草藥中,發(fā)現(xiàn)并分離獲得近100種多種結(jié)構(gòu)類(lèi)型的生物堿成分其中31種為新結(jié)構(gòu)生物堿,有5種新結(jié)構(gòu)生物堿成分分別具有抗3種人癌細(xì)胞(肺癌、胸腺癌和直腸癌細(xì)胞)的活性,另1種新結(jié)構(gòu)生物堿成分具有抗人胃癌細(xì)胞活性。
(英國(guó)),Planta Medica(美國(guó)),Cancer Letters(英國(guó)),International J.of Oriental Medicine(美國(guó)),Chinese Chemical Letters,Chinese J.of Chemistry,藥學(xué)學(xué)報(bào),化學(xué)學(xué)報(bào)等著名的學(xué)術(shù)專(zhuān)業(yè)刊物。論文曾參加9次在國(guó)內(nèi)外召開(kāi)的國(guó)際專(zhuān)業(yè)學(xué)術(shù)會(huì)議。
成就
開(kāi)發(fā)中草藥研究以解決亟須的有關(guān)藥物問(wèn)題
20世紀(jì)50年代,國(guó)內(nèi)抗生素類(lèi)藥物十分缺乏,1959~1960年內(nèi),在黃連復(fù)方的研究中,證明了黃連所含的小檗堿化合物的抑菌效強(qiáng),毒性低,抗菌譜較廣,為安全有效的抗菌藥物。于是篩選出含小檗堿含量較高的三顆針根,這些植物所含小檗堿,經(jīng)證明都是以其鹽酸鹽形式存于植物體中,經(jīng)水煮,浸液中加入少量食鹽,即可析出99%以上的小檗堿。如此,創(chuàng)造出十分簡(jiǎn)易的小檗堿生產(chǎn)方法,推廣并輪訓(xùn)了四川農(nóng)村中的合作醫(yī)療單位工作人員,自行生產(chǎn)這種小檗堿,不同程度地緩解了農(nóng)村亟須的抗菌藥物問(wèn)題,從那時(shí)起小檗堿(民間叫黃連素)正式列為醫(yī)藥。
農(nóng)村中對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥中毒的解毒藥阿托品十分缺乏。1960年發(fā)現(xiàn)四川省甘孜地區(qū)特產(chǎn)植物唐古特東莨菪,經(jīng)反復(fù)研究,研究出于其植物浸膏中以一步溶媒法生產(chǎn)出高純度的l-莨菪堿。并設(shè)計(jì)了一種雙向逆流分配器,使原料浸膏與溶劑相對(duì)反向轉(zhuǎn)移,連續(xù)提取出高純度的l-莨菪堿,再轉(zhuǎn)化為阿托品(dl-莨菪堿)。這一生產(chǎn)過(guò)程,曾介紹與成都藥廠(chǎng)進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)。1963年再次介紹與昆明藥廠(chǎng)進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn),獲得很好的效果。以上兩項(xiàng)科研成果,曾受到四川醫(yī)學(xué)院院長(zhǎng)劉承昭教授高度評(píng)價(jià)和表彰。1958年從事毛地黃毒苷的生產(chǎn)研究。氧化鋁柱層析,一次可獲得高熔點(diǎn)240~241℃,高效價(jià)1克等于1 030.7國(guó)際單位的產(chǎn)品毛地黃毒苷,其熔點(diǎn)高于E.Merck公司出品的熔點(diǎn)12℃。該研究獲國(guó)家衛(wèi)生部獎(jiǎng)狀和獎(jiǎng)?wù)隆?/p>
1958年,本人于打破碗花花中獲得白頭翁素、原白頭翁素,并在威靈仙,茴茴蒜中獲得原白頭翁素。證明為殺滅蛆蟲(chóng)的有效成分。并做了股癬、足癬等臨床試驗(yàn),療效較好。
在分離方法的研究中,對(duì)液—液萃取方法進(jìn)行了深入系統(tǒng)地研究,創(chuàng)制了輕溶媒轉(zhuǎn)移的逆流分配器、重溶媒轉(zhuǎn)移的逆流分配器、雙向轉(zhuǎn)移的逆流分配器、螺旋液滴逆液分配器和用于沙氏提取器中的輕溶媒、重溶媒提取器,這些裝置在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中都獲得很好的分離效果。為了植物細(xì)胞中的化學(xué)成分結(jié)構(gòu)不致在濃縮浸液時(shí)因溫度過(guò)高,加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而分解破壞,或產(chǎn)生結(jié)構(gòu)上的變異,特設(shè)計(jì)了“實(shí)驗(yàn)室用管狀薄膜式蒸發(fā)器”,這一設(shè)計(jì)使?jié)饪s的浸液,在每毫升受熱時(shí)間縮短為0.17秒,受熱溫度在45℃左右,減壓為4.5~5mmHg。
在層析方法的研究中,吸附劑紙層析分離法,以及結(jié)合電泳的分離法。對(duì)植物成分的分離,純化都收到很好的效果。
石菖蒲(Acoras gramineus)同一品種,因產(chǎn)地不同,其揮發(fā)油成分差異很大。按其成分,至少可分為6個(gè)化學(xué)類(lèi)型。成都產(chǎn)石菖蒲揮發(fā)油,存在輕油和重油二種。為此設(shè)計(jì)了一種可以同時(shí)分別測(cè)定收集輕油和重油的裝備,置于沙氏提取器中,可很方便地準(zhǔn)確測(cè)定收集兩種揮發(fā)油,將所獲得的這兩種油分別進(jìn)行氣相色譜—質(zhì)譜分析,發(fā)現(xiàn)這兩種油的組成一致,只是β-細(xì)辛醚的含量不同。重油中含量較大為36.7%,輕油中含23.8%。同時(shí)根據(jù)堿催化重排反應(yīng),順式的細(xì)辛醚轉(zhuǎn)為反式(α)細(xì)辛醚的規(guī)律,對(duì)比催化反應(yīng)前后的氣—質(zhì)譜中,保留時(shí)間先后兩個(gè)分子量208的面積峰的增減而進(jìn)一步確證兩種細(xì)辛醚的存在,因此確立成都產(chǎn)石菖蒲為β-細(xì)辛醚化學(xué)型。
黃芩(Scutellaria baicalensis,唇形科),抑菌成分的分離研究中,于黃芩中獲得黃芩苷(baicalein)C15H10O5和黃芩素(Wogonin)C16H12O5二種結(jié)晶成分,確定前者有顯著的抗菌作用,后一種效果不明顯。
大黃Rhcum officinale的研究,將大黃中的蒽酯衍生物及非蒽醌衍生物分別分離。結(jié)果證明蒽醌衍生有熔點(diǎn)216~218℃,246~247℃,300℃以上的化合物,及大黃酸具有抑菌效。未獲得蒽醌衍生物的苷類(lèi)。
甘草抗菌成分的研究,發(fā)現(xiàn)甘草栓皮的水浸液具有較強(qiáng)的抗菌作用(金黃色葡萄球菌),在醇溶物中,經(jīng)過(guò)陽(yáng)離子交換劑,Al2O3柱,收集黃色粉末具有較強(qiáng)抗菌效,熔點(diǎn)300℃以上,醇不溶物經(jīng)Al2O3柱層析,仍獲得具有抗菌效的成分。
于甘草中獲得一種淡黃色黃酮化合物,具有能增強(qiáng)小檗堿抗金黃色葡萄球菌的效力5倍,并獲得liquiritin為淡色細(xì)結(jié)晶,具有抗金黃色葡萄球菌效力。
1960年甘孜東莨菪(Scoplia)根中生物堿研究,經(jīng)過(guò)溶媒法和紙層析法等方法研究于根中獲得莨菪堿(0.2%)紅古豆堿(cuscohygrine)(多量),經(jīng)元素分析證實(shí)莨菪堿C17H23O3N為白色長(zhǎng)針狀結(jié)晶,硫酸鹽熔點(diǎn)204~205℃,苦味酸鹽熔點(diǎn)163~165℃。消旋化后得阿托品堿(atropine)熔點(diǎn)114~116℃,硫酸鹽195~196.5℃,〔α〕D±0。紅古豆堿苦味酸鹽元素分析為C13H24ON2·C6H3N3O7,鮮黃色針晶,熔點(diǎn)214℃(分解)。云南三分三(Scoplia lurida)(喜馬拉亞?wèn)|莨菪)同時(shí)證明有莨菪堿,只含很少量的紅古豆堿。再于著者設(shè)計(jì)的逆流分配器中進(jìn)行了研究。
1975~1979年對(duì)馬桑寄生治療精神病的研究中,于馬桑寄生葉中獲得三種有效結(jié)晶成分,并研究出這三種有效成分的大量生產(chǎn)方法。交由有關(guān)人員進(jìn)行生產(chǎn)。本研究獲四川省科技二等獎(jiǎng)。
高山刺黃柏(Mahonia bealei)根中獲得生物堿,證明對(duì)痢疾的療效,優(yōu)于小檗堿(berberine),毒性低于小檗堿(LD50:30mg/kg小鼠)。經(jīng)純化獲得藥根堿(jatrohizine),并利用400MHz,1 HNMR,13 CNMR和質(zhì)譜等分析,補(bǔ)充了光譜數(shù)據(jù)。進(jìn)一步確證了藥根堿的細(xì)微結(jié)構(gòu)。同時(shí)作了乙酰膽堿酯酶的抑制活力,P388鼠白血病細(xì)胞、KB鼻咽癌細(xì)胞、海洋蝦試驗(yàn)等細(xì)胞毒活性測(cè)定,以及E.coil.S.aureus,Bacillus subtilis等的抑制活性測(cè)定。
含生物堿植物的化學(xué)成分研究
20世紀(jì)50年代進(jìn)行了黃連及其復(fù)方的研究。研究了有關(guān)復(fù)方配伍的中藥的化學(xué)成分。并系統(tǒng)地研究了主要幾種黃連:峨眉連(雅連),石柱連,前者采自四川省峨眉山海拔2000米洗象池一帶、高山斜坡45度向陽(yáng)地帶。而石柱連栽培海拔較低,形成向上的簇狀根莖。增加根莖重較大,5年生可達(dá)12.5克,重為峨眉連的5倍。峨眉野連生長(zhǎng)時(shí)期為50年以上的根莖,以及云南黃連。系統(tǒng)地研究了植物形態(tài)組織和小檗堿在植物中的分布。發(fā)現(xiàn)含小檗堿細(xì)胞分布于根莖的外皮層,及受傷部分,以及木質(zhì)細(xì)胞壁中,石柱連中最多,峨眉連次之,野連中最少。為了黃連的生物堿含量分析,首次研究了Al2O3柱層析比色定量分析法。以最小二乘法求得測(cè)定值與濃度之間的經(jīng)驗(yàn)方程和δ0值。經(jīng)此方程處理,獲得精密可信的結(jié)果。發(fā)現(xiàn)花期(3~4月)根莖中小檗堿的絕對(duì)值,隨每株根莖重量下降而降低,收獲期(9~11月),則隨每株根莖重量增高而增高,11月后則漸降低。在峨眉連根莖的節(jié)結(jié)中,小檗堿含量比其節(jié)間跳桿高,花芽中含量最高,須根中可含1%小檗堿。發(fā)現(xiàn)花期(3~4月)每株峨眉連根莖的平均重量及小檗堿含量的絕對(duì)值,都同時(shí)較花期前1月降低1/3。如此,確證小檗堿在植物代謝過(guò)程中與其他細(xì)胞內(nèi)容物同樣被利用。因而否定當(dāng)時(shí)(20世紀(jì)50年代)Cromwell和Chatterjce二人認(rèn)為小檗堿為植物代謝的廢物,不被植物利用的論斷。
對(duì)這類(lèi)生物堿的分離,進(jìn)行溶媒分離。結(jié)果于石柱連和峨眉連中分別獲得大量小檗堿外,還獲得worenine,palmatine,jatrorrhizine和幾種非酚性和酚性小檗堿型生物堿,未獲得coptsine。
為了研究這些黃連中的原始狀態(tài)的季胺型小檗堿化合物,設(shè)計(jì)了紙層析法研究,進(jìn)行了石柱連、峨眉連、野連、云連、馬尾黃連、黃柏、十大功勞、三顆針、大黃刺、小黃刺等植物的根莖、根、根皮中這類(lèi)生物堿的紙層析研究。在黃連根莖中,可以分離出14種以上的這類(lèi)生物堿,并證明存在這些植物中的小檗堿,都是以氯化物的形式存在,即C20H18O4N·Cl·2H2O。
為了進(jìn)一步大量分離黃連中原始狀態(tài)的季胺小檗堿型生物堿,設(shè)計(jì)了“管式逆流分配器”。對(duì)幾種黃連中原始狀態(tài)的季胺堿的分離,獲得很滿(mǎn)意的效果。
黃連復(fù)方的配伍藥分別也進(jìn)行了研究,1958年獲國(guó)家衛(wèi)生部表?yè)P(yáng),為研究中藥復(fù)方的范例。
正當(dāng)王憲楷教授年富力強(qiáng),成果日豐之時(shí),一場(chǎng)浩劫席卷了全國(guó)。他正在進(jìn)行的科研工作被迫停止,多年來(lái)含辛茹苦寫(xiě)成的《植物成分的分析鑒定——生物堿》、《植物成分的分析鑒定—苷類(lèi)及揮發(fā)油》等150多萬(wàn)字的書(shū)稿,正由人民衛(wèi)生出版社準(zhǔn)備排印,也付之一炬。
粉碎“四人幫”后,已逾花甲之年的王憲楷,重新煥發(fā)青春,積極投身教學(xué)科研工作中。并在66歲的高齡,還帶領(lǐng)研究生去3000多米的巴郎山、小金一帶高山,調(diào)查采集科研樣品,歷盡艱險(xiǎn),完成改革開(kāi)放后第一位碩士生的論文題的調(diào)查采集工作。曾多次應(yīng)邀到云南等地去講學(xué),作學(xué)術(shù)報(bào)告。1985年,參加了在日本京都召開(kāi)的第四屆東洋醫(yī)學(xué)會(huì)的國(guó)際學(xué)術(shù)會(huì)議。使他初步看出,國(guó)際上研究中醫(yī)中藥的一般情況。1985年提出建立“天然藥物化學(xué)”學(xué)科,獲得有關(guān)方面的贊同,1986年王教授擔(dān)任“天然藥物化學(xué)”統(tǒng)編教材第一版主編。在該書(shū)的緒言、總論、生物堿章以近30萬(wàn)字的篇幅,展示論證了成立“天然藥物化學(xué)”這門(mén)學(xué)科的理論基礎(chǔ),獲得一致好評(píng)。
20世紀(jì)80年代初,中藥石斛的研究,發(fā)現(xiàn)商品名有多種石斛,每一種商品名下,可包括石斛屬植物多達(dá)7種的有3種,包括2~4種植物的也有3種。有21種石斛屬植物隸屬于此8種商品名之下。且尚不恒定,十分混亂。同時(shí)石斛的加工方法,各地差異很大,無(wú)一定程序,曾擇市售商品環(huán)草和馬鞭石斛與其組成商品的原植物之一的粉花石斛和達(dá)鞘石斛鮮品植物各10公斤,進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn),不但商品無(wú)生物堿反應(yīng),且大量樣品的水、醇浸出物的量,都很微。而川石斛則是惟一的單一植物,金釵石斛Dendrobium nobile。
為了提高川石斛生產(chǎn)的質(zhì)量,在四川省洪雅縣川石斛產(chǎn)區(qū),對(duì)樹(shù)栽石斛實(shí)地調(diào)查采集樣品。并于四川省石棉縣烏絲河一帶采收大量的野生石生金釵石斛,進(jìn)行系統(tǒng)研究。并將此石生石斛移栽于喜樹(shù)、油桐、十大功勞等植物樹(shù)干上。3年后作對(duì)比研究寄生植物對(duì)附生其上的石斛中化學(xué)成分的影響情況。洪雅產(chǎn)區(qū)采集的11種樹(shù)上栽培的金釵石斛,分別將其莖、葉中的總生物堿部分,進(jìn)行氣—質(zhì)譜分析。發(fā)現(xiàn)喜樹(shù)、杏樹(shù)和椿樹(shù)上栽培的金釵石斛,有較多的其他成分存在,說(shuō)明寄生植物對(duì)附生其上的石斛成分,有明顯的影響。同時(shí)將11種樹(shù)栽的金釵石斛的莖、葉分別作24個(gè)酒精浸出物樣品,從中再分別分離出中、酸性(B),乙醚溶性生物堿(C)和氯仿溶性生物堿(D)共72個(gè)提出物。應(yīng)用紫外光譜,紅外光譜及薄層層析譜,對(duì)B和D進(jìn)行對(duì)比分析,發(fā)現(xiàn)不同樹(shù)栽的金釵石斛的同一部位的提出物,其溶液的色澤、物理性狀、紫外光譜、紅外光譜和薄層分析之間都存在顯著的差異。這一結(jié)論進(jìn)一步證實(shí)了,寄生植物明顯地影響附生其上的金釵石斛中的化學(xué)成分。因而這很可能影響金釵石斛的正常療效。因此,提出大力發(fā)展石栽金釵石斛的建議,得到四川省金釵石斛產(chǎn)區(qū)的支持。
為了金釵石斛石栽技術(shù)的研究,需要主要成分石斛堿的定量分析法。發(fā)現(xiàn)石斛堿對(duì)22種常用的生物堿顯色劑無(wú)色反應(yīng),但可使碘鉑酸試劑的桃紅色褪為無(wú)色。在噴上此試劑的Al2O3-G薄層層析板上呈桃紅色的底板,石斛堿則呈現(xiàn)出周界鮮明的白色斑點(diǎn)。利用作為薄層層析斑點(diǎn)面積定量分析,證明石斛堿的斑點(diǎn)面積與其含量之間存在直線(xiàn)關(guān)系。以最小二乘法求出其經(jīng)驗(yàn)公式,并將斑點(diǎn)放大19.1倍進(jìn)行測(cè)量,降低了可測(cè)誤差。用此法測(cè)得10種樹(shù)栽金釵石斛莖和葉中的石斛堿含量,分別平均為0.59%和0.58%。而石生金釵石斛莖中含石斛堿高達(dá)3.18%,葉含0.83%。并建議葉可入藥。1985年獲四川省科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)及優(yōu)秀論文獎(jiǎng)。
從四川省石棉縣烏絲河野生石生金釵石斛中,獲得1種新生物堿A.mp.210~211℃,分子式為C16H23O4N,IR指示具有OH,內(nèi)酰胺基,比石斛堿多2O,少2H,比石斛堿的氧化物,內(nèi)酰胺氧石斛堿,多一個(gè)O原子,與6羥基石斛堿(石斛氨堿dendramine)的氧化物內(nèi)酰胺,氧石斛氨堿的分子式一致。但后者的mp.為291℃,推知A的OH不位于C6,與石斛堿和2-羥基石斛堿的質(zhì)譜比較,指示A同具石斛堿基核。而A的M-167碎片指示O原子位于C14,OH位于C13,即為13-羥基-14-氧石斛堿。1 HNMR和13 CNMR 支持這一論斷。按IUPAC定位系統(tǒng),A標(biāo)為3-羥基-2氧石斛堿。為了進(jìn)一步弄清石斛堿和這一新生物堿的微細(xì)結(jié)構(gòu),以利構(gòu)效關(guān)系的研究,采用了當(dāng)時(shí)在天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)的闡明中尚少應(yīng)用的2-DCOSY譜,詳盡地指定了這2種生物堿的微細(xì)結(jié)構(gòu)。該文曾于1985年7月參加在美國(guó)北卡羅林納召開(kāi)的“國(guó)際天然產(chǎn)物研究會(huì)”發(fā)表。
野生于四川省巴郎山、小金一帶的罌粟科植物藏藥紅花綠絨蒿(Meconopsis panicea)生物堿的研究,曾在四川省巴郎山3000米草甸區(qū)和小金縣5000米山區(qū)采得該種植物。該藥當(dāng)?shù)夭孛裼糜谥委煱l(fā)熱、頭痛、有利尿、定喘咳、止痢瀉功效。研究本種植物中獲8種化合物,其中包括四氫小檗堿型生物堿meconbridine和1種新生物堿,后者為前者的甲氧基衍生物,和前者的季胺堿alborine,文獻(xiàn)報(bào)道證明meconbridine具有中樞鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用。
四川千金藤(Stephania sutchuenensis)(防己科),采于四川省彭州市白水河山區(qū),民間用作治療感冒、風(fēng)濕痛、發(fā)熱、喉痛療效優(yōu)于葛根。研究結(jié)果于根中獲得包括5種基核的10種生物堿,即:①氧阿樸堿類(lèi)有:liviodenine,oxoanolobine和1種新生物堿,命名stephanonine,羰基位C4的阿樸堿;②雙芐基異喹啉堿類(lèi)有:tetrandrine,thalrugsine;③原阿樸堿類(lèi)有:pronuciferine和1種新堿命名sutchuenenoline;④嗎啡烷類(lèi)有:sinococuline;和2種⑤hasubanan類(lèi)生物堿:aknadinine及另1種新堿,為前者C1硝基化合物,命名nitroaknadinine。證明sinococuline對(duì)幾種癌細(xì)胞具有殺滅活性,aknadinine和nitroaknadinine抗癌活性較低(Cancer Letters,1996,99.217)。
峨眉紫堇(Corydalis omeiensis)屬罌粟科,俗稱(chēng)“山香”,為四川省峨眉山特產(chǎn),民間用于解毒清熱、鎮(zhèn)痛、驅(qū)風(fēng)濕、消腫等疾患。于峨眉紫堇根中獲得13種生物堿。于光譜分析和化學(xué)、物理屬性確定為:①四氫小檗堿型的tetrahydrocolumbamine;②苯酞異喹啉類(lèi)的corlumine,bicuculline;③原鴉片堿類(lèi)的cryptopine,muramine,α-allo-cryptopine和protopine。本種植物中共存4種原鴉片堿類(lèi)成分,屬首次發(fā)現(xiàn)。
輪環(huán)藤屬(Cyclea)屬防己科,對(duì)產(chǎn)自四川省崇慶縣山區(qū)的輪環(huán)屬(Cyclea racemosa)的生物堿進(jìn)行研究。當(dāng)?shù)貞?yīng)用根有消炎、止痛、清熱解毒的效果。經(jīng)研究于其根中獲得4種結(jié)晶,光譜等鑒定為cycleamine,insularine,isochondodendrine和1種新BBI生物堿。首次利用1 HNMR,13CNMR光譜結(jié)合dreiding模型分析確定C-18元環(huán)首—尾氧橋兩個(gè)芳環(huán)(C,Cu2019環(huán))的相對(duì)構(gòu)型。此新堿命名(+)cycleaneonine,其中13CNMR譜中有4個(gè)δ值相同的聯(lián)氫芳碳,兩個(gè)相近δ值的聯(lián)烷基芳碳,說(shuō)明分子中具一個(gè)對(duì)二甲基苯基部分,苯環(huán)C,Cu2019可自由旋轉(zhuǎn),分子的二氧醚環(huán)大于18 元的首—尾氧橋BBI生物堿,屬cissampareine型,但具有NCH3的新生物堿。此物證明具有顯著的抗人胃癌細(xì)胞的活性。本植物的地上部分中也獲得cycleanine,insularine和新堿(+)cycleaneonine。
四川輪環(huán)藤(Cyclea sutchuenensis)采自四川省古藺縣山區(qū)。為我國(guó)西南地區(qū)特產(chǎn)。據(jù)當(dāng)?shù)夭葆t(yī)介紹具清熱止痛、通經(jīng)、治淋癥、牙痛。分析證明根中除獲得cycleanine,disochondodendrine,insularine和insulanoline(A)外,還獲得10種BBI生物堿。①2種屬cissampareine型:(-)-cycleaneonine,isocycleaneonine(Ⅰ),在其莖中還獲得(+)cycleaneonine。后者是在前種植物中獲得的新堿。文獻(xiàn)得知這種類(lèi)型的BBI生物堿只在防己科Cissampelos屬植物中發(fā)現(xiàn)7種,結(jié)構(gòu)上無(wú)N-CH3存在。上述這3種首—尾氧橋的生物堿,是第一次從Cyelea屬植物中發(fā)現(xiàn),并且都具有NCH3.(+)-cycleaneonine已證明具有顯著的抗人胃癌細(xì)胞活性。并證明(—)-cycleaneonine和isocycleaneonine(1)包括insulanoline(A)分別對(duì)3種人癌細(xì)胞:人肺癌細(xì)胞(A549);人胸腺癌細(xì)胞(MCF-7)和人結(jié)腸癌細(xì)胞(HT-29)具有顯著的抑制活性。
另3種新堿屬于7,12u2019—單氧橋BBI生物堿,命名為sutchuenenine(3),neosutchuenenine(4)和sutchueneneonine(5)。已知只獲得7,10u2019和7,11u2019單氧橋結(jié)合的各3個(gè)堿,迄今尚未發(fā)現(xiàn)過(guò)本植物中所獲得的7,12u2019單氧橋BBI的化合物。
另外還獲得2種新的首尾氧橋型的BBI生物堿,命名isocycleanine(8,12u2019和8u2019,12氧橋)(6)和sutchuenensine (8,12,和7u2019,12氧橋)(7)。這些結(jié)構(gòu)都是借助于NOE 效應(yīng)確定的。
同時(shí)還發(fā)現(xiàn)2種新的BBI的氮氧化物。命名insularine2β-N-oxide(8)和insularine-2u2019β-N-oxide(9)。并制備了幾種insularine的N-氧化物加以確證。
幾種成分的抗人癌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn),系美國(guó)Purdue大學(xué)藥學(xué)院MDCH代作。
植物環(huán)肽目前為較新的研究領(lǐng)域,我國(guó)尚屬起步階段。除了從小紅參、太子參、銀柴胡中發(fā)現(xiàn)幾種環(huán)肽生物堿外,其他尚未見(jiàn)有報(bào)道。于石竹科繁縷亞科中3種藥用植物:繁縷屬的云南繁縷(Stellaria yunnanensis),大葉繁縷(Stellaria delauayi)和無(wú)心菜屬的山銀柴胡(Arenaria juncea)進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。
云南繁縷又名千針萬(wàn)線(xiàn),為云南省民間草藥,具健脾、養(yǎng)肝、益腎功能。從其鮮根中獲得9種環(huán)肽成分,其中證明了3種七肽,2種八肽,1種九肽,2種五肽;大葉繁縷又名土黨參,為云南民間特有草藥,具有壯陽(yáng)功效,于其鮮根中獲得5個(gè)環(huán)肽,包括3個(gè)八肽、2個(gè)十一肽;山銀柴胡具有清熱涼血功效,從中獲得1個(gè)七肽。
這些環(huán)肽化合物的結(jié)構(gòu)證明,是利用最新的二維核磁技術(shù)如同核1H的雙量子相干相關(guān)譜(DQC-COSY),多重同核中繼相干傳遞二維譜(TOCSY),1H檢測(cè)的異核的多量子相關(guān)譜(HMQC),1H檢測(cè)的異核多鍵相關(guān)譜(HMBC),以及核overhausor效應(yīng)和交換實(shí)驗(yàn)(NOESY),結(jié)合快原子轟擊質(zhì)譜(FABMS)和酶降解技術(shù),轉(zhuǎn)為直鏈,經(jīng)HPLC精制,得直鍵肽,利用手工DABITC/PITC雙偶合法技術(shù)完成氨基酸序列的確證。
在這3種草藥中共獲得15個(gè)新的環(huán)肽化合物,包括2個(gè)五肽,2個(gè)六肽,4個(gè)七肽,4個(gè)八肽,1個(gè)九肽和2個(gè)十一肽。涉及12種常見(jiàn)氨基酸和1種非典型氨基酸。在此之前,植物環(huán)肽的研究主要是鼠李科環(huán)肽和茜草科環(huán)肽生物堿。前者共同具有醚鍵的13-14元環(huán)的柄型化合物,后者則同具醚鍵雙環(huán)結(jié)構(gòu)的化合物。而上述這3種植物中獲得的這15個(gè)環(huán)肽生物堿,除stellaria B和C兩者,可看作是具有共同的基核外,其余化合物的基本結(jié)構(gòu),沒(méi)有共同的特點(diǎn),因而在結(jié)構(gòu)鑒定中難度較大。環(huán)肽生物堿的研究,可進(jìn)一步啟發(fā)一些常見(jiàn)氨基酸及其肽化合物的研究,導(dǎo)致開(kāi)發(fā)對(duì)人體易于親和的一些氨基酸為基礎(chǔ)的理想藥物。
中壩附子,特產(chǎn)于四川省江油縣(中壩)、彰明縣一帶。近40年來(lái)主要以南瓜葉、鵝掌葉和小花葉附子3種作為生產(chǎn)栽培種。而這3種葉形的植物學(xué)名都定為Aconitum carmichacli Delex(毛茛科)。
于鵝掌葉附子中獲得C19-二萜堿:neoline,fuziline,mesaconitine,hypaconitine,aconitine,和1種新的N-CHO二萜堿。命名為aldohypaconitine以及2種新的氮氧化物:mesaconitine-N-oxide-(α)和-(β)。同時(shí)還獲得C20二萜堿:songorine和songoramine。采用了雙共振去偶技術(shù)首次確定了這些生物堿結(jié)構(gòu)中各質(zhì)子的詳細(xì)的確切歸屬。新堿aldohypaconitine的結(jié)構(gòu),是以hypaconitine經(jīng)KMnO4氧化合成確證的。對(duì)三種葉形的附子各以60公斤分析其中的生物堿含量。結(jié)果彼此的差異很大。
王憲楷教授于1982年著文《一般分離方法和處理?xiàng)l件對(duì)植物成分結(jié)構(gòu)的影響》藥學(xué)通報(bào)1982,17(10):28發(fā)表,舉出一些數(shù)量的實(shí)例,證明天然藥物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu),在分離、鑒定結(jié)構(gòu)過(guò)程中,不可避免的光照、溶劑、酸堿以及層析的接觸,往往會(huì)引起某些化學(xué)反應(yīng)而導(dǎo)致成分化學(xué)結(jié)構(gòu)的改變。早期證明蘿芙木屬(Rauwlfia)植物中所發(fā)現(xiàn)的60~70種已證明了結(jié)構(gòu)的吲哚生物堿。后來(lái)再次分離時(shí),獲得的化合物有些證明是人工產(chǎn)物,有些原來(lái)獲得并證明了結(jié)構(gòu)的成分,不能再次獲得。因此,王教授提出:在植物中獲得的成分,如何保證就是那個(gè)植物本來(lái)存在的那個(gè)結(jié)構(gòu)的成分問(wèn)題。特別在研究中草藥的活性成分時(shí),結(jié)構(gòu)上小有改變,其生理活性可能有很大的變異。實(shí)質(zhì)上,不能再次獲得的那個(gè)成分,就很難認(rèn)為是那個(gè)植物中本來(lái)存在的成分。
主要論著
1 王憲楷,李美蓉,涂茂利.川產(chǎn)黃連的形態(tài)組織及組織中小檗堿分布的研究.(黃連研究第一報(bào))—四川醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),黃連專(zhuān)輯,1959,1:1.
2 王憲楷,楊培全,陳新民.川產(chǎn)野(黃)連根莖中生物堿(黃連研究第四報(bào)).藥學(xué)學(xué)報(bào),1964,6:382.
3 王憲楷,楊培全,陳新民.石柱(黃)連根莖中生物堿的研究(黃連研究第五報(bào)).藥學(xué)學(xué)報(bào),1964,6:390.
4 王憲楷.黃連原始狀態(tài)生物堿成分的逆流分配法研究(黃連研究第六報(bào)).中國(guó)藥學(xué)會(huì),1962年學(xué)術(shù)論文集,1963,9:103.
5 王憲楷.管式逆流分配器.藥學(xué)學(xué)報(bào),1963,10(8):510.
6 王憲楷.實(shí)驗(yàn)室用管狀薄膜蒸發(fā)器.藥學(xué)學(xué)報(bào),1960,8(1):57.
7 王憲楷,趙同芳,車(chē)鎮(zhèn)濤.Dendrobine and 3-Hydroxy-2-oxo-dendrobine from Dendrobium nobile Journal of Natural Products,1985,48 (5):796.